1  酱油二次离心沉淀制备的方法

    ( 1) 静置法: 酱油( 500 mL，玻璃瓶装) 购买后室温静置10 天，虹吸法抽去上清液，留下最后约20 mL 酱油和沉

淀摇匀后置于湖南湘仪实验室仪器开发有限公司生产的TDZ5-WS低速离心机离心收集沉淀，TDZ5-WS离心机离心参数为4500 r/min， 30 min。( 2) 直接离心法: 将酱油摇匀后置于湖南湘仪TDZ5-WS离心机中进行离心分离( 4500 r /min， 30 min) ，收集离心管底部沉淀。( 3) 冷冻法: 酱油在0 ℃冰箱放置24 h，然后置于湖南湘仪离心机中离心分离( 4 500 r /min，30 min) ，收集离心管底部沉淀。( 4) 超声波法: 酱油超声波处理8 min 后，然后置于离心机中离心分离( 4 500 r /min，30 min) ，收集离心管底部沉淀。( 5) 低温-超声法: 酱油超声波处理8 min，再放入0 ℃冰箱中冷冻24 h，然后置于离心机中离心分离( 4 500 r /min， 30min) ，收集离心管底部沉淀。将收集的沉淀在－ 40 ℃下冷冻4 h，冷冻样品进行抽真空冷冻干燥3 d 得酱油二次沉淀。制备沉淀后的上清液于常温下静置30 d，观察上清液发生浑浊和沉淀的情况。

     2 湖南湘仪离心机仪器有限公司对酱油二次沉淀蛋白质的溶解性测定:用K2HPO4、柠檬酸、四硼酸钠、CaCl2、NaOH 和重蒸水等试剂配制不同pH( 2. 5 ～ 13. 5) 的缓冲溶液。取0. 1 g 样品放入10 mL 不同缓冲液中溶解，用振荡器充分混合，溶液置于湖南湘仪TDZ5-WS离心机中于4500 r /min 离心15 min( 20℃) ，取上清液，测蛋白质浓度。

    3 氨基酸态氮和蛋白质含量的测定:氨基酸态氮和蛋白质含量的测定方法分别参照GB /T 5009. 40 － 2003 和微量凯氏定氮法GB 5009. 5－ 1985，总氮与蛋白质的换算系数以6. 25 计算。

     4 NaCl 含量的测定:参照GB /T 5009. 39 － 2003。

     5 总糖的测定:称取一定量的酱油二次沉淀( 控制最终溶液中总糖含量1 ～ 2 g /L) 于500 mL 容量瓶中，加水50mL，6 mol /L HCl 5 mL，68 ～ 70 ℃水浴加热15 min。冷却后加入甲基红指示液2 滴，用NaOH 溶液( 200g /L) 滴定至红色消失( 近中性) ，加水定容、摇均、冷却后备用。其他步骤参照还原糖测定方法GB /T5009. 7 － 2003。

    上文便是湖南湘仪离心机仪器有限公司介绍的 酱油二次离心沉淀制备的方法。仅供大家参考！