关键词: 补骨脂; 盐炙; 成骨细胞; 骨质疏松症

1 仪器与试药

1. 1 仪器ZesisAxion A1倒置显微镜( 德国Zesi公司);CO2培养箱( 德国MEMMEＲT INE600公司);TDZ5-WS低速离心机(湖南湘仪离心机仪器公司);Bio-ＲadModel 550型酶标仪( 美国Bio-Ｒad公司) 。

1. 2 药物与试剂补骨脂生品 ，经南京中医药大学陈建伟教授鉴定，为豆科植物补骨脂Psoralea corylifoliaL．的干燥成熟果实。α-MEM 培养基;胎牛血清;青/链霉素溶液;胰蛋白酶;MTT;碱性磷酸酶试剂盒;细胞钙茜素红染色试剂盒。

1. 3 动物SP级雌性SD大鼠30只，体质量250～300g，由浙江省实验动物中心提供，动物许可证号SCXK ( 浙) 2014-0001。饲养条件: 室温( 23±2) ℃，相对湿度( 60±5) %，12h光照，标准营养颗粒饲料喂养，自由饮水。

2 实验方法

2. 1 样品制备

2. 1. 1 盐补骨脂的制备根据《中国药典》2010年版一部附录ⅡD盐炙法自制。其炮制工艺为取补骨脂生品，加盐水拌匀，闷润透，置炒制容器内，以文火加热，炒至有香气溢出，表面焦黄时，取出，放凉( 注: 每100kg补骨脂用食盐2 kg) 。

2. 1. 2 补骨脂水煎液的制备取补骨脂生品和盐炙品各50g，置于砂锅之中，精密加入水500mL，武火煎煮至沸，文火煎煮20min，煎煮2次，过滤，合并2次煎煮滤液，使用旋转蒸发仪浓缩至0.2g/mL，备用。

2. 2 湖南湘仪离心机对含药血清的制备。30只大鼠随机分为3组:空白组、补骨脂组和盐补骨脂组。每天分别灌胃给补骨脂生品以及盐炙品的水提液( 2mL/200g) ，空白组口服给生理盐水。连续给药7d，第7天灌胃给药1h后，所有大鼠，心脏插管取血，室温下静置1h，置于湖南湘仪TDZ5-WS离心机中以3600r/min离心10min，取血清。所收集的血清于56℃灭活30min，过滤除菌后保存于－80℃，备用。本实验研究盐炙对补骨脂体外药效的影响，采用体外成骨细胞模型，采用MTT法，ALP活性测定法，茜素红染色法，研究补骨脂含药血清对于成骨细胞活性的影响，结果显示补骨脂的含药血清具有成骨细胞活性，能够促进成骨细胞的增、分化和矿化，盐炙增强了补骨脂含药血清促进成骨细胞增殖、分化和矿化的活性。