TG16-WS  TDZ5-WS  湘仪离心机 H1850R
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用湘仪离心机进行梯度洗脱分离

[导读]利用湖南湘仪高速离心机TG16-WS进行梯度洗脱分离。

1 测定方法。称取2g均匀试样于50ml塑料离心管中,加入20ml乙腈-水( 7:3,V/V) 溶液、振匀,超声提取20min。置于湖南湘仪离心机中低温( -4℃) 下以10000r/min离心15min,然后将上清液转移至100ml梨形瓶中,于60℃水浴中旋转蒸发至干。将所得残渣用2ml甲醇-水(50∶50,V/V) 溶液溶解后转移至2ml离心管中,置于湖南湘仪离心机中以10000r/min离心5min,然后取上清液供UPLC -MS/MS 测定。

2 结果

2. 1 湖南湘仪离心机公司分析色谱条件的优化对比不同类型的色谱柱

( Syncronis C18柱、BEHC18柱、HSST3柱) ,结果发现ACQUITY UPLC BEH C18柱( 2.1mm×100mm,1.7μm) 对目标物保留较好。分别用乙腈-乙酸铵( 20mmol/L) 、乙腈- 水作为流动相,在相同色谱柱和仪器条件下进行梯度洗脱分离。结果发现用乙腈-乙酸铵( 20mmol/L) 作流动相时,目标物的峰形较好,峰面积较大,说明乙酸铵能够改善极性较强的红2G。

2. 2 质谱条件的优化用甲醇- 水( 1∶1,V/V) 配制浓度为1μg/ml的红2G标准溶液,按照本文的仪器条件对红2G进行质谱调谐和参数优化,使其定性离子、定量离子的能量最高。红2G的定性离子、定量离子及相应的质谱参数。

2. 3 溶剂的选择

2. 3.1 样品定容溶剂的选择本实验使用乙腈作为定容液时,发现红2G在XIC图上出现2个目标峰,而且峰形拖尾,影响目标物的定性和定量; 改用甲醇-水( 50∶50,V /V) 溶液作为定容液,XIC 图上只有一个目标峰,峰形良好。因此,本实验选择甲醇- 水( 50∶50,V /V) 溶液作为样品的定容液。

2. 4 提取液净化方式的选择有机溶剂提取肉类食品中的红2G常常会有油脂、蛋白等大分子物质的干扰。实验通过对比C18固相萃取柱、聚酰胺粉吸附剂和低温高速离心等几种净化方式的样品加标回收率发现,前2种净化方式的目标物回收率较低,说明净化过程中目标物损失较大。此外,使用聚醚砜、尼龙等材质的滤膜过滤定容液也会降低目标物的回收率。因此,选择低温高速离心的方式净化样品提取液。同时,可以采用空白基质溶液配制标准曲线的方式来减轻基质效应。



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